Das gewünschte mikrobielle Wissen
Mikroorganismen sind eine Gruppe winziger Organismen, die in der Natur weit verbreitet und mit bloßem Auge unsichtbar sind und mit Hilfe eines optischen Mikroskops oder eines Elektronenmikroskops hundert-, tausend- oder sogar zehntausendfach vergrößert werden müssen. Sie haben die Vorteile kleiner Größe, einfacher Struktur, schneller Reproduktion, einfacher Variation und starker Anpassungsfähigkeit an die Umgebung.
Klassifizierung von Mikroorganismen:
Es gibt viele Arten von Mikroorganismen, mindestens mehr als 100,000 Arten. Nach Struktur, chemischer Zusammensetzung und Lebensgewohnheiten sowie weiteren Unterschieden lassen sie sich in drei Kategorien einteilen.
Eukaryotischer mikrobieller Zellkern hat einen höheren Differenzierungsgrad, einschließlich Kernmembran, Nukleolus und Chromosomen; Zytoplasma hat vollständige Organellen (wie endoplasmatisches Retikulum, Ribosom und Mitochondrien usw.). Pilze gehören zu dieser Art von Mikroorganismen.
Prokaryotische mikrobielle Zellen haben einen geringen Grad an Kerndifferenzierung, nur primitives Nukleoplasma, keine Kernmembran und keinen Nukleolus; Organellen sind nicht sehr vollständig. Es gibt viele Arten solcher Mikroorganismen, einschließlich Bakterien, Spirochäten, Mykoplasmen, Rickettsien, Chlamydien und Actinomyceten.
Azelluläre Mikroorganismen haben keine typische Zellstruktur und kein Enzymsystem zur Energiegewinnung und können nur in lebenden Zellen wachsen und sich vermehren. Viren gehören zu dieser Art von Mikroorganismen.
Trennung und Reinigung von Mikroorganismen
Eine mikrobielle Kultur, die mehr als eine Art enthält, wird als Mischkultur bezeichnet. Wenn alle Zellen einer Kolonie von einer Elternzelle abstammen, wird die Kolonie als Reinkultur bezeichnet. Bei der Identifizierung von Bakterienarten müssen die verwendeten Mikroorganismen im Allgemeinen Reinkulturen sein. Der Prozess zur Gewinnung einer Reinkultur wird als Trennung und Reinigung bezeichnet, und es gibt viele Methoden.
1. Gießplattenmethode
Zuerst wird die mikrobielle Suspension in einer Reihe verdünnt, und eine bestimmte Menge der Verdünnung wird vollständig mit dem gelösten Nähragarmedium gemischt, das bei etwa 40-50 Grad gehalten wird, und dann wird die Mischung in eine sterile Petrischale gegossen. Nach dem Erstarren wurde die Platte kopfüber in einer Konstantkammer inkubiert. Eine einzelne Zelle wird vermehrt, um eine Kolonie zu bilden, eine einzelne Kolonie wird genommen, um eine Suspension herzustellen, und die obigen Schritte werden mehrere Male wiederholt, um eine reine Kultur zu erhalten.
2. Beschichtungsmethode für flache Platten
Zuerst wird die Keimsuspension richtig verdünnt und eine bestimmte Menge der Verdünnung auf eine erstarrte sterile Nähragarplatte gegeben und dann die Verdünnung mit einem sterilen Glasspatel gleichmäßig auf der Oberfläche des Mediums verteilt. Eine einzelne Kolonie kann durch Inkubation bei einer konstanten Temperatur erhalten werden.
3. Plattenritzverfahren
Der einfachste Weg, Mikroorganismen zu isolieren, ist das Ausstreichen. Streichen Sie eine kleine Menge der Kultur mit einer sterilen Öse auf der Platte aus. Es gibt viele Schreibmethoden. Die gebräuchlichen Anreißmethoden, bei denen es wahrscheinlicher ist, dass eine einzelne Kolonie erscheint, sind die Schrägstrichmethode, die Kurvenmethode, die Quadratmethode, die Strahlungsmethode und die Viergittermethode. Wenn sich die Impföse auf der Oberfläche des Mediums zurückbewegt, wird die Bakterienflüssigkeit auf der Impföse allmählich verdünnt und schließlich wird eine einzelne Zelle auf der gezogenen Linie verstreut. Nach der Kultur wächst jede Zelle zu einer Kolonie heran.
4. Anreicherungskulturmethode
Die Methode und das Prinzip der Anreicherungskulturmethode sind sehr einfach. Wir können Bedingungen schaffen, die es nur den gewünschten Mikroben ermöglichen zu wachsen, und unter diesen Bedingungen können die gewünschten Mikroben effektiv mit anderen Mikroben konkurrieren und andere Mikroben hinsichtlich der Wachstumsfähigkeit weit übertreffen. Wenn einige obligate Parasiten isoliert werden sollen, müssen die Proben in die entsprechenden anfälligen Wirtszellpopulationen inokuliert werden, um in großer Zahl zu wachsen. Reine parasitäre Bakterien können durch wiederholtes Aussäen gewonnen werden.
5. Anaerobe Methode
Im Labor kann zur Isolierung einiger anaerober Bakterien ein Reagenzglas mit dem Originalmedium als Kulturgefäß verwendet und das Reagenzglas einige Minuten in einem kochenden Wasserbad erhitzt werden, um den im Medium gelösten Sauerstoff auszutreiben . Es wird dann schnell abgekühlt und inokuliert. Nach der Inokulation wurde steriles Paraffin auf die Oberfläche des Mediums gegeben, um das Medium von der Luft zu isolieren. Eine andere Methode besteht darin, das Gas im Medium nach der Inokulation durch N2 oder CO2 zu ersetzen und dann die Mündung des Reagenzglases über einer Flamme zu versiegeln. Um einige anaerobe Bakterien effizienter zu isolieren, kann manchmal die isolierte Probe auf das Medium geimpft werden, und dann kann die Petrischale in eine vollständig versiegelte anaerobe Kulturvorrichtung gestellt werden.
6. Einzelzell- (oder Einzelsporen-) Isolierungsverfahren
Es ist ein Mikroseparationsverfahren anzuwenden, um einzelne Zellen oder einzelne Individuen direkt aus gemischten Populationen für die Kultur zu isolieren, um eine Reinkultur zu erhalten. Bei größeren Mikroorganismen kann ein einzelnes Individuum mit einer Kapillare extrahiert werden. Für Mikroorganismen mit relativ kleinen Individuen ist ein Mikromanipulator erforderlich, um einzelne mikrobielle Zellen oder Sporen mit einer Kapillare oder Mikronadel, einem Haken, einer Schleife usw. unter dem Mikroskop zu entnehmen, um eine Reinkultur zu erhalten. Das Einzelzell-Trennverfahren stellt relativ hohe Anforderungen an die Betriebstechnik.
Mikrobielle Kultur
1. Je nachdem, ob während der Kultur Sauerstoff benötigt wird, kann diese in zwei Kategorien eingeteilt werden: aerobe Kultur und anaerobe Kultur.
Aerobe Kultur: auch bekannt als "aerobe Kultur". Das heißt, wenn dieser Mikroorganismus kultiviert wird, muss ihm Sauerstoff zugeführt werden, sonst wächst er nicht gut. Im Labor werden Schrägkulturen gewonnen, indem sterile Luft von außen durch Wattebausch gewonnen wird. Der größte Teil der Flüssigkultur im Erlenmeyerkolben wird mit einem Schüttler geschüttelt, damit die Außenluft kontinuierlich in die Flasche gelangen kann.
Anaerobe Kultur: Auch bekannt als "anaerobe Kultur". Solche Mikroorganismen benötigen keinen Sauerstoff, um an der Kultivierung teilzunehmen. Im Kultivierungsprozess von anaeroben Mikroorganismen ist der wichtigste Punkt, den Sauerstoff aus dem Medium zu entfernen.
2. Je nach physikalischem Zustand des Mediums kann es in zwei Kategorien eingeteilt werden: feste Kultur und flüssige Kultur.
Festkultur: Es ist eine Methode, die Stämme in ein lockeres und nährstoffreiches festes Medium zu inokulieren und Mikroorganismen unter geeigneten Bedingungen zu kultivieren.
Flüssigkultur: In Experimenten kann die Flüssigkultur Mikroorganismen dazu bringen, sich schnell zu vermehren und eine große Anzahl von Kulturen zu erhalten. Unter bestimmten Bedingungen ist es auch eine effektive Methode für Mikroorganismen, um Bakterien zu selektieren und anzureichern.
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Einweg-Impfstäbchen/-öse aus Kunststoff:
Polystyrolmaterial (PS);
Schadstofffrei, Endotoxin-, DNase-, RNase- und pyrogenfrei;
Unabhängige Verpackung wurde sterilisiert;
Feine Verarbeitung und vollständige Spezifikationen;
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Schadstofffrei, Endotoxin-, DNase-, RNase- und pyrogenfrei;
L-förmiges Design, einfach zu bedienen;
Einmaliger Gebrauch, leicht und bequem.
Edelstahl-/sterile Einweg-Spezifikationsschilder:
Das Typenschild aus Edelstahl besteht aus Edelstahl und das Wegwerf-Typenschild aus Polypropylen (PP) in Lebensmittelqualität.
Schadstofffrei, Endotoxin-, DNase-, RNase- und pyrogenfrei;
Der Schmierbereich ist streng genormt
Eine Seite des Typenschilds ist mit einem Griff ausgestattet, der einfach zu bedienen ist
Steril versiegelte Einzelverpackung, um Sekundärkontamination der Probenahme und Fehler in den Ergebnissen zu vermeiden
Einmalige Verwendung, um Kreuzkontaminationen zu vermeiden und den Arbeitsaufwand zu reduzieren
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Aufrichtig
Michael Peng
michael@bkmbio.com