Mikroorganismen sind eine Gruppe mikroskopisch kleiner Organismen, die in der Natur weit verbreitet und für das bloße Auge unsichtbar sind, einschließlich Bakterien, Spirochäten, Rickettsien, Chlamydien, Mykoplasmen, Actinomyceten, Pilze, Viren usw., mit einfacher Struktur und in Einzelzellen vorhanden, Zellgruppe oder Nicht-Zellzustand. Unter den Bedingungen der Bereitstellung von Nährstoffen und einer geeigneten Umgebung können sie im Allgemeinen unabhängig leben und schnell wachsen. Um den Tod und die Verschmutzung von Mikroorganismen zu vermeiden, ihre ursprünglichen Eigenschaften im Wesentlichen stabil zu halten und die Forschung und Verwendung zu erleichtern, ist es notwendig, die Technologie der Stammkonservierung einzusetzen. Hier sind einige gängige Methoden zur Konservierung von Bakterien.
Kryokonservierung
Diese Methode eignet sich für die meisten Mikroorganismen und Viren, die eine Langzeitkonservierung benötigen. Das Prinzip ist, dass in der Umgebung mit extrem niedrigen Temperaturen die mikrobielle Stoffwechselaktivität stoppt, und im Allgemeinen gilt, je niedriger die Temperatur, desto besser die Wirkung.
Speichermethode
Verwenden Sie ein Kryokonservierungsröhrchen, um die Bakterien zu konservierenria, und benötigen gleichzeitig Schutzmittel wie Glycerin, entfettetes Schafsmehl oder Dimethylsulfoxid. Das gefrorene Aufbewahrungsröhrchen mit den Bakterien wird zum Einfrieren und Aufbewahren in einen Kühlschrank bei - 60~- 80 Grad gestellt.
Konservierungsverfahren mit flüssigem Paraffin
Das Konservierungsverfahren mit flüssigem Paraffin ist auf einige Bakterien anwendbar, die Paraffin nicht abbauen können, wie Hefe, Bazillus, Penicillium, Aspergillus usw. Einige Bakterien und Pilze sind für die Konservierung durch dieses Verfahren nicht geeignet. Bei der Flüssigparaffinmethode wird flüssiges Paraffin zum Abdecken verwendet, der mikrobielle Stoffwechsel wird gehemmt und die bakterielle Alterung verzögert. Die Paraffinmethode kann das Eindringen von Sauerstoff verhindern, wodurch aerobe Bakterien nicht weiter wachsen können. Wenn gleichzeitig das Wasser im Kulturmedium verdunstet, kann es leicht zum Bakterientod kommen. Die Paraffinmethode kann das Verdunsten des Wassers im Kulturmedium verhindern und die Konservierungszeit von Bakterien verlängern.
Speichermethode
Injizieren Sie unter sterilen Bedingungen sterilisiertes flüssiges Paraffin in die neu gezüchtete Schrägkultur, der Flüssigkeitsstand ist 1 cm ~ 2 cm höher als die Oberseite der Schräge, fügen Sie einen Gummistopfen hinzu und versiegeln Sie ihn mit festem Paraffin, um die Bakterien von der Luft zu isolieren. Der mit Paraffinöl injizierte Stamm sollte aufrecht an einem trockenen Ort bei niedriger Temperatur (4 Grad ~6 Grad) oder bei Raumtemperatur gelagert werden.
Konservierungsverfahren durch Gefriertrocknung
Dieses Verfahren ist für die Konservierung der meisten Mikroorganismen geeignet, jedoch nicht für Fadenpilze, die keine Sporen produzieren. Die Gefriertrocknungskonservierungsmethode besteht darin, Bakterien unter trockenen und anoxischen Bedingungen bei niedriger Temperatur zu konservieren. Das heißt, den Stamm schnell bei niedriger Temperatur einfrieren, um den Mikroorganismus intakt zu halten, und dann die Luft dekomprimieren und extrahieren, um das Eis zu sublimieren, bis es dehydriert und getrocknet ist, und die Luft im leeren Zustand versiegeln und isolieren, um die mikrobielle Stoffwechselaktivität zu stoppen , um es lange zu erhalten.
Speichermethode
Geben Sie gemäß einer bestimmten Formel Schutzmittel in das Ampullenröhrchen und fügen Sie dann Bakterien hinzu, um eine Bakteriensuspension herzustellen. Das Ampullenrohr auf - 15~- 20 Grad vorbefreien, dann das Ampullenrohr mit einem Gefriervakuumtrockner trocknen und das Ampullenrohr versiegeln. Bei niedriger Temperatur und vor Licht geschützt lagern.
Methode der Sandrohrkonservierung
Dieses Verfahren ist für die Konservierung von sporogenen Actinomyceten, Bacillus usw. geeignet, nicht jedoch für die Konservierung von Pilzen und pathogenen Pilzen, die sich hauptsächlich auf die Hyphenentwicklung konzentrieren. Die Verwendung von feinem Sand zur Schaffung trockener Bedingungen kann die Stoffwechselaktivitäten jener Mikroorganismen verlangsamen, die in trockener Umgebung Sporen oder Sporen produzieren können, ihre Fortpflanzungsgeschwindigkeit hemmen und eine starke Resistenz gegen den Tod haben. Diese Methode kann Stammmutationen reduzieren und die Überlebenszeit verlängern.
Speichermethode
Sieben Sie Fluss- und Seesand mit 60 Maschen, entfernen Sie große Partikel und Verunreinigungen und sieben Sie dann mit 80 Maschen, um feinen Sand zu entfernen. Nehmen Sie das Eisen mit dem Eisenabsorptionsstein auf, geben Sie es in den Behälter und tränken Sie es mit 10-prozentiger Salzsäure. Wenn der Flusssand viele organische Stoffe enthält, tränken Sie ihn mit 20-prozentiger Salzsäure. Nach 24 Stunden Salzsäure entfernen, mehrmals in Leitungswasser einweichen, bis es neutral ist, und den Sand backen oder trocknen. Zusätzlich wurden zehn Böden unterhalb der unkontaminierten Oberfläche 100 Tage lang gescreent, mit Leitungswasser neutral gewaschen und getrocknet. Gleichmäßig je nach Sand mischen: Boden =2:1, in Ampullenröhrchen oder kleines Reagenzglas unterpacken, die Höhe beträgt etwa 1 cm, Wattestopfen verschließen, bei 121 Grad für 1 h ~ 1,5 h autoklavieren oder bei autoklavieren Normaldruck für 3 mal, 16 mal am Tag. Trocknen Sie es unter 50 Grad (die Temperatur sollte nicht zu hoch sein, da sonst die organische Substanz des Bodens durch hohe Temperaturen zersetzt wird, um schädliche Substanzen zu produzieren, die die Leistung der Sorte beeinträchtigen), und es kann nur verwendet werden, wenn es keine gibt mikrobielles Wachstum nach der Inspektion.
Bereiten Sie dann die Bakteriensuspension vor und geben Sie die Bakteriensuspension in das Sandrohr. Legen Sie das Sandrohr mit Bakteriensuspension zur Vakuumtrocknung in den Vakuumtrockner. Verwenden Sie eine Flamme, um die Düse zu versiegeln und zu schmelzen, lagern Sie sie bei niedriger Temperatur (4 Grad ~ 10 Grad) oder an einem trockenen Ort bei normaler Temperatur und überprüfen Sie regelmäßig die Vitalität und verschiedene Bakterien.
Konservierungsverfahren für Porzellanperlen
Für die Niedertemperaturkonservierung von Bakterien gibt es auf dem Markt meist fertige Porzellanperlen-Konservierungsröhrchen, die einfach zu handhaben sind. Das Konservierungsröhrchen für Porzellanperlen besteht normalerweise aus einem gefrorenen Aufbewahrungsröhrchen sowie der inneren Konservierungslösung und den Porzellanperlen. Porzellanperlen mit konkaver und konvexer Oberfläche werden zur Adsorption und Konservierung von Bakterien verwendet. Der Stamm kann lange bei - 20 Grad oder - 80 Grad gelagert werden. Es ist einfacher zu bedienen, sei es bei der Lagerung oder bei der Wiederbelebung.
Speichermethode
Kratzen Sie die reine Bakterienkultur von der Platte und geben Sie sie in das Kulturerhaltungsröhrchen und konfigurieren Sie sie grob in 3-4 Michaelis-Konzentrationen. Schütteln, um Bakterien zu emulgieren, Waschen Sie die Konservierungslösung, ziehen Sie das Konservierungsröhrchen fest und frieren Sie es bei niedriger Temperatur ein.
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