Ich weiß nicht, ob Sie häufig Verbrauchsmaterialien kaufen müssen. Wenn Sie häufig Laborverbrauchsmaterialien kaufen, stellen Sie möglicherweise fest, dass verschiedene Hersteller ihre Produkte möglicherweise als enzymfrei, pyrogenfrei und endotoxinfrei kennzeichnen, insbesondere bei Verbrauchsmaterialien für Zellbiologie und analytische Biologie, wie z. Zellkulturschalen, Zellkulturplatten, Kryokonservierungsröhrchen PCR-Board und andere Produkte. Produkte mit diesen Beschreibungen können auch teurer sein als gewöhnliche ähnliche Produkte. Was bedeuten diese Aussagen also und wie wirken sie sich auf unsere Experimente aus? Wie sollten wir Entscheidungen treffen, wenn wir Einkäufe tätigen? Hier ist eine kurze Einführung.
Definition
1. Pyrogen
Pyrogen bezieht sich auf die pyrogene Substanz, die einen abnormalen Anstieg der Körpertemperatur verursachen kann, nachdem sie in den Körper injiziert wurde. Im weiteren Sinne schließt Pyrogen bakterielles Pyrogen, endogenes makromolekulares Pyrogen, endogenes niedermolekulares Pyrogen und chemisches Pyrogen ein. Das "Pyrogen" bezieht sich hier hauptsächlich auf bakterielles Pyrogen, das der Metabolit einiger Mikroorganismen, Bakterienleichen und Endotoxin ist.
2.Enzym
Enzyme wurden in der Junior High School gelernt. Als biologischer Katalysator können Enzyme verschiedene biochemische Reaktionen in unserem Organismus effizient katalysieren. Wenn jedoch bei den meisten Produkten kein Enzym steht, meinen sie eigentlich genauer gesagt nicht alle Enzyme, sondern Nukleasen. Viele Hersteller schreiben auch DNase-frei und RNase-frei. Nuklease kann Nukleinsäuremoleküle zersetzen. Es kann DNA oder RNA spezifisch abbauen und mit geringer Spezifität sowohl auf DNA- als auch auf RNA-Moleküle einwirken.
3.Endotoxin
Endotoxin ist ein allgemeiner Begriff für toxische Substanzen, die in gramnegativen Bakterien vorkommen. Es ist die Zellwandkomponente einer Vielzahl von gramnegativen Bakterien. Es ist das Toxin, das freigesetzt wird, nachdem die Zelle geknackt wurde, und die Komponente ist Lipopolysaccharid. Es wird allgemein angenommen, dass Endotoxin ein Pyrogen ist. Bei der Arzneimittelherstellung gilt allgemein: Ohne Endotoxin kein Pyrogen. Daher darf während der Produktion nur ein Endotoxintest ohne Pyrogentest durchgeführt werden.
Beeinflussen
Pyrogene und Endotoxine können den Körper anregen und Fieber verursachen. In pharmazeutischen, klinischen und anderen Bereichen gibt es aus Gründen der menschlichen Sicherheit üblicherweise Anforderungen an die Menge an Pyrogen und Endotoxin. Im Chinesischen Arzneibuch wurden spezifische Verfahren zum Nachweis von Pyrogen und Endotoxin angegeben. In Molekularlabors kann Nuklease Zielmolekülfragmente abbauen, da sie DNA zersetzen kann. Wenn beispielsweise in PCR-Experimenten Nuklease kontaminiert ist, kann es sein, dass kein CT-Wert vorhanden ist, was zu falsch positiven Ergebnissen führt. Daher sind Verbrauchsmaterialien wie Sauger und PCR in der Regel nukleasefrei.
Nachweis von Pyrogen und Endotoxin
Das Folgende ist eine kurze Einführung in die Pyrogen- und Endotoxintests im Arzneibuch.
1. Pyrogentest
Die Kaninchenmethode zum Pyrogennachweis ist in der Allgemeinen Regel des Chinesischen Arzneibuchs 1142 beschrieben. Verwenden Sie gesunde und qualifizierte Kaninchen, injizieren Sie Kaninchen eine bestimmte Menge der Testsubstanz intravenös und beobachten Sie den Temperaturanstieg der Kaninchen innerhalb der angegebenen Zeit. Die mit dem Prüfgegenstand in Kontakt kommenden Prüfutensilien müssen steril und pyrogenfrei sein. Das Pyrogen wird normalerweise durch Trockenhitzesterilisation (250 Grad, mehr als 30 Minuten) oder andere geeignete Verfahren entfernt. Wenn die Temperatur des getesteten Kaninchens innerhalb eines bestimmten Zeitraums auf einen bestimmten Standard ansteigt, wird davon ausgegangen, dass der Pyrogentest des Testartikels die Anforderungen nicht erfüllt.
2.Endotoxin-Test
Vor dem Endotoxin-Test wurde international der Limulus-Test verwendet. Spezifische Verfahren umfassen das Gelverfahren und das photometrische Verfahren. Das Limulus-Reagenz kann mit bakteriellem Endotoxin agglutinieren, um eine Gel- oder Trübungsänderung zu erzeugen, und der Endotoxingehalt kann durch Messen dieser Änderung bestimmt werden. Tachypleus-Amöbozytenlysat ist eine Art Reagenz, das aus dem Blut des marinen Arthropoden Tachypleus-Amöbozytenlysat gewonnen wird. Daher wurde Tachypleus-Amöbozytenlysat weltweit in großen Mengen gefangen und getötet und ist auch in China zu einem national geschützten Tier zweiter Klasse geworden. Derzeit hat die FDA die rekombinante C-Faktor-Methode als Ersatz für das TAL-Reagenz zugelassen. Dieses Gesetz wurde auch in den Leitprinzipien des Chinesischen Arzneibuchs erwähnt.
So wählen Sie aus
Tatsächlich ist es nicht schwierig, sich zu entscheiden, nachdem man diese Konzepte verstanden hat. Sie orientiert sich hauptsächlich an Ihren eigenen Bedürfnissen. Im Allgemeinen sind Verbrauchsmaterialien ohne Enzyme und Pyrogene weit verbreitet, und Produkte ohne Endotoxin sind relativ wenige. Wenn das Experiment selbst keine hohen Anforderungen an diese stellt, können gewöhnliche Verbrauchsmaterialien verwendet werden. Zum Beispiel ist es beim Zentrifugieren von Zellen oder verwandten Komponenten besser, ein Zentrifugenröhrchen ohne Enzyme und Pyrogene zu verwenden, während gewöhnliche Zentrifugenröhrchen tatsächlich für gewöhnliche Flüssigkeitszentrifugation verwendet werden können.
Darüber hinaus ist dies auch ein Problem, das viele Benutzer haben werden. Beim Kauf von Zentrifugenröhrchen von einigen Unternehmen fragen sie, ob die Zentrifugenröhrchen wiederverwendet werden können. Tatsächlich wird dieses Problem je nach Situation diskutiert, da die Zentrifugenröhrchen nach einmaligem Gebrauch bis zu einem gewissen Grad verschmutzt wurden und selbst eine Druckdampfsterilisation die Verschmutzung nicht vollständig beseitigen kann. Wenn Sie sie daher erneut verwenden, ist dies der Fall hängt von den eigenen Bedürfnissen des Benutzers für das Experiment ab.
Letztendlich sind alle Produkte für Experimentatoren und Experimente. Wir können unsere Experimente aufgrund der Produkte nicht beeinflussen, aber wir müssen die geeigneten Produkte gemäß unseren Experimenten auswählen.
BKMAM Pyrogenfrei, Ribozymfrei, Endotoxinfrei Zentrifugenröhrchen, 0,5 ml, 1,5 ml, 2 ml, 5 ml, 10 ml, 15 ml, 50 ml zur Auswahl.
Pyrogenfrei, Ribozymfrei, Endotoxinfrei Cryovials-Röhrchen, Innengewinde, Außengewinde, mit 1 ml, 2 ml, 3 ml, 4 ml, 5 ml zur Auswahl.
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